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指纹图谱:余甘子叶药材的HPLC指纹图谱研讨

毛健+++刘振杰[摘要]意图树立余甘子叶的指纹图谱。办法选用高效液相色谱法测定,乙腈-0.1%磷酸溶液梯度洗脱,流速1.0ml/min,柱温25℃,紫外检测波长218nm。成果余甘子叶中有15个共有峰被断定为指纹峰,选用《中药色谱指纹图谱类似度点评体系A版》核算机软件点评10批余甘子叶指纹图谱的类似性,其成果均>0.9。定论该办法简

毛健+++刘振杰

[摘要] 意图 树立余甘子叶的指纹图谱。 办法 选用高效液相色谱法测定,乙腈-0.1%磷酸溶液梯度洗脱,流速1.0 ml/min,柱温25℃,紫外检测波长218 nm。 成果 余甘子叶中有15个共有峰被断定为指纹峰,选用《中药色谱指纹图谱类似度点评体系A版》核算机软件点评10批余甘子叶指纹图谱的类似性,其成果均>0.9。 定论 该办法简洁,安稳,精细度高,重现性好,可用于余甘子叶的辨别,作为质量操控办法。

[关键词] 余甘子叶;高效液相色谱法;指纹图谱

[中图分类号] R284.1[文献标识码] A[文章编号] 1674-4721(2014)06(b)-0011-04

Study on HPLC fingerprint analysis of Phyllanthus emblica L.

MAO Jian1 LIU Zhen-jie2▲

1.Department of Clinical medicine,People′s Hospital of Fuchuan County in Hezhou City of Guangxi Zhuang Autonomous Region,Fuchuan 542700,China;2.Conservation Center,Guangxi Institute of Medicinal Plant,Guangxi Zhuang Autonomous Region,Nanning 530023,China

[Abstract] Objective To establish a method of fingerprint analysis on Phyllanthus emblica L. by HPLC. Methods The chromatographic finger-prints were obtained by HPLC.The detective wave-length was set at 218 nm;the flow rate was 1.0 ml/min and the column temperature was maintained at 25℃. Results 15 co-possessing peaks were selected as the fingerprint peaks of Phyllanthus emblica L. and good similarities with correlation coefficients higher than 0.9 were found in fingerprints between the different samples of Phyllanthus emblica L. and the standard fingerprint. Conclusion The method with good reproducibility is simple and accurate,it can be used as an effective quality control method for Phyllanthus emblica L.

[Key words] Phyllanthus emblica L.;High performance of liquid chromatography;Fingerprint

余甘子叶(Phyllanthus emblica L.)系大戟科(Euphorbiaceae)叶下珠属(Phyllanthus)余甘子Phyllanthus emblical L.落叶小乔木或灌木的叶[1],余甘子树在我国资源丰富,收载于1978年版《藏药规范》、1974年出书的《云南省药品规范》和多版《中华人民共和国药典》,别号有橄榄、滇橄榄、油甘子、山油甘、庵摩勒、牛甘子、喉甘子、杨甘等,余甘子果果实生食酸甜酥脆,初食味酸涩,后回味甜美爽口,故名余甘[2]。余甘子味甘、酸、涩、性凉,具有化痰止咳,健胃消食,清热生津,保肝解毒等成效[3]。主治伤风发热、咳嗽、咽喉痛、白喉、烦热口干、消化不良、腹痛、缓慢肝炎、高血压、肥胖症、高脂血症、湿热性水肿、尿频、血病、赤巴病、培根病、肝病、心脏病,以医治血热血瘀引起的血病为长[4]。近年研讨标明余甘子具有抗菌[5]、抗肿瘤[6]、抗氧化[7]、抗动脉粥样硬化[8-9]、抗乙型肝炎病毒[10]、保肝[11]、增强免疫[12-13]等效果。余甘子有多种化学成分,药理活性研讨首要会集在多酚类成分上,槲皮素、没食子酸为其有用成分[14-15]。本试验对余甘子叶进行指纹图谱研讨,以期对其质量操控和点评供给有用办法。

1 试验资料

1.1 仪器

Agilent1100高效液相色谱仪;含在线真空脱气机;高压四元梯度泵;可变波长检测器;二极管阵列检测器Agilent1100;Series色谱工作站(美国安捷伦科技公司);SB3200T超声波清洗仪(上海能信超声有限公司);BP211D电子剖析天平(德国赛多利斯)。

1.2 试剂

甲醇、乙腈为色谱纯,乙酸乙酯、磷酸及其他试剂均为剖析纯。水为超纯水。槲皮素对照品和没食子酸对照品由我国药品生物制品检定所供给(槲皮素对照品批号:110081-200406;没食子酸对照品批号:110831-200302)。

1.3 药材

试验所用余甘子叶药材于广西各地及云南玉溪搜集,产地和采收时刻见表1,经广西中医学院药用植物教研室刘寿养副教授鉴定为余甘子Phyllanthus emblica L.的枯燥叶。

表1 余甘子叶产地和批号

2 办法与成果

2.1 供试品溶液制备

取余甘子叶粗粉1.0 g,精细称定,置于具塞锥形瓶中,精细加甲醇25 ml,密塞,称重量。静置1 h,超声30 min后放冷,补重,滤过,精细量取续滤液20 ml,挥干,残渣用25 ml水溶解至分液漏斗中,参加乙酸乙酯振摇提取3次,每次25 ml,兼并乙酸乙酯液,蒸干,残渣加甲醇使溶解,置25 ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,离心,取上清液为供试品溶液。

2.2 提取溶剂的调查

比较水、无水乙醇、甲醇等提取溶剂,成果标明以甲醇、无水乙醇提取时,所得的色谱图中的色谱峰数较多;余甘子叶的现代研讨标明,没食子酸和槲皮素为余甘子叶的有用成分,所以以其没食子酸和槲皮素含量核算,用甲醇为溶剂,药材中没食子酸和槲皮素提取较彻底[16]。经归纳考虑,选定提取溶剂为甲醇。

2.3 超声时刻的调查

样品别离超声20、30、40 min,成果标明,超声的时刻为30 min以上,以其没食子酸和槲皮素含量核算,药材提取较彻底。故选定提取时刻为超声30 min。

2.4 色谱条件

色谱柱:Thermo Hypersil BDS C18(5 μm,4.6 mm×250 mm);活动相为乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱(表2);柱温25℃;检测波长218 nm;进样量5 μl。

表2 活动相梯度洗脱程序

2.5 办法学调查

2.5.1 精细度试验取批号为200701药材,制备供试品溶液,接连进样5次,各色谱峰的相对保存时刻RSD<1.42%,相对峰面积RSD<2.94%,成果标明,仪器的精细度杰出。

2.5.2 安稳性试验取批号为200701药材,制备供试品溶液,别离在0、4、8、12、16、24 h进样检测共有峰的相对保存时刻RSD<1.30%,相对峰面积RSD<2.47%,成果标明,常温下样品溶液在24 h内安稳性杰出。

2.5.3 重重复性试验精细称取批号为200701药材5份,制备供试品溶液,接连进样,共有峰的相对保存时刻RSD<1.65%,相对峰面积RSD<2.78%,成果标明重现性杰出。

2.6 余甘子叶HPLC指纹图谱及技术参数

2.6.1 指纹图谱挑选及特征峰的标定测定10批余甘子叶88 min内指纹图谱,取得15个共有峰,由指纹图谱能够看出1号峰峰面积积分百分比较大,别离度及峰形较好,因而挑选1号峰作为参照峰,标号为S,其他特征峰顺次标号为S,2,3,……,15。选用国家药典委员会公布的《中药色谱指纹图谱类似度点评体系A版》核算机软件对10批余甘子叶图谱进行处理得到规范指纹图谱(图1)和指纹图谱纵向叠加图(图2)。

图1 余甘子叶规范HPLC指纹图谱

图2 10批余甘子叶的HPLC指纹图谱纵向叠加图

2.6.2 余甘子叶指纹图谱特征峰相对保存时刻和相对峰面积的断定选用10批余甘子叶的指纹图谱,选用1号峰作为参照峰,选取10批样品的共有峰共15个,核算相对保存时刻(表3)和相对峰面积(表4)。

2.6.3 指纹图谱类似度的核算选用《中药色谱指纹图谱类似度点评体系A版》核算机软件对10批余甘子叶指纹图谱进行处理得到指纹图谱类似度剖析成果。10批次不同产地余甘子叶样品的HPLC指纹图谱与对照指纹图谱的类似度核算成果均>0.9,别离为0.966、0.969、0.973、0.981、0.931、0.902、0.963、0.955、0.983、0.974,标明各批次余甘子叶药材与对照指纹图谱有较好的共同性。

3 评论

余甘子叶药材的成分杂乱,本文通过调理活动相洗脱程序,使各成分在整个剖析时刻段内充沛别离洗脱。在活动相体系的挑选,本文调查了乙腈-水、甲醇-水、乙腈-磷酸、甲醇-磷酸体系,成果标明各成分在乙腈-水、甲醇-水中无法别离,峰形差。在酸性活动相中,磷酸可改进其别离度与峰形,比照甲醇-磷酸体系、乙腈-磷酸,前者洗脱才能较弱,各组分出峰时刻太慢,色谱图基线漂移,不能到达中药指纹图谱色谱峰基线别离的要求,故本文选用乙腈-磷酸体系。通过屡次优化发现在100 min内能较好地别离余甘子叶中各组分,重现性杰出。

本文调查了三种不同的色谱柱对指纹图谱的影响,成果标明,同一色谱办法,不同色谱柱,会发生不同的别离效果,使得某些成分无法到达基线别离,一起,对柱效、峰形也有不同程度的影响。美国热电BDS色谱柱在试验过程中能使各首要有用成分有较好的别离效果,故本文挑选了美国热电BDS色谱柱。

余甘子叶中已知成分有没食子酸、槲皮素,两者最大吸收波长为270 nm和370 nm,本文根据此特色,用二极管阵列检测器,别离在210、218、258、270、280、300、360 nm检测色谱图,并一起取得全波长三维色谱图,成果标明218 nm的色谱图能给出最多峰信息,故本文终究选定218 nm为检测波长。

试验成果显现,10批指纹图谱中首要峰群的全体图貌根本共同,但各成分的共有色谱峰峰面积存在必定差异。此研讨为快速辨别和区别不同来历的余甘子叶以及进一步对其进行全面质量操控研讨供给了科学的根据,一起关于余甘子叶药材的选购和用药具有必定的指导效果。

[参考文献]

[1]卫生部药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:我国医药科技出书社,2010:167.

[2]王辉.余甘子的化学成分和药理效果研讨进展[J].我国现代中药,2011,13(11):52.

[3]周涛,邱德文.民族药余甘子的本草药学概略[J].贵阳中医学院学报,2002,24(3):3.

[4]罗兰.闽药余甘子药理效果及提取别离办法研讨进展[J].海峡药学,2013,25(11):18

[5]钟振国,曾春兰.余甘子叶提取物体外抗菌试验研讨[J].中药材,2008,31(3):428.

[6]曾春兰,钟振国.余甘子叶提取物体外抗肿瘤效果研讨[J].时珍国医国药,2008,19(3):580.

[7]潘国庆,赵旭升,蒋炘治.余甘子抗氧化效果的研讨[J].青海科技,2007,12(6):33.

[8]王绿娅,王大全,秦彦文,等.余甘子抗脂质过氧化和维护血管内皮的试验研讨[J].我国药学杂志,2003,38(10):505.

[9]刘丽梅,高政,李宝文.余甘子对试验性颈动脉粥样硬化家兔的影响[J].我国临床恢复,2003,7(5):766.

[10]黄正昌,邓学龙,朱宇同,等.台湾细叶油柑体内外抗乙肝病毒效果研讨[J].广州中医药大学学报,2000,17(3):260.

[11]李萍,谢金鲜,林启云.民族药余甘子对D2半乳糖胺所造成的小鼠急性肝损害的影响[J].我国民族民间医药杂志,2003,12(3):161.

[12]罗春丽.余甘子对肿瘤细胞抑制效果及免疫调理的研讨[J].我国试验方剂学杂志,2010,16(13):155.

[13]崔炳权,何震宇,杨泽民,等.余甘子提取物对小鼠免疫功用的影响[J].时珍国医国药,2010,21(8):1920.

[14]陈国珍,张颖君,蔡文锋,等.余甘子中水解单宁类化合物体外抗氧化活性研讨[J].我国药理通讯,2003,20(1):5.

[15]梁臣艳,甄汉深,刘振杰,等.广西余甘子叶醋酸乙酯部位化学成分的研讨[J].中成药,2009,31(5):761

[16]刘晓丽,赵谋明.余甘子果汁活性成分与抗氧化活性研讨[J].食物与发酵工业,2006,23(5):151.

(收稿日期:2014-03-08本文修改:郭静娟)

2.5.2 安稳性试验取批号为200701药材,制备供试品溶液,别离在0、4、8、12、16、24 h进样检测共有峰的相对保存时刻RSD<1.30%,相对峰面积RSD<2.47%,成果标明,常温下样品溶液在24 h内安稳性杰出。

2.5.3 重重复性试验精细称取批号为200701药材5份,制备供试品溶液,接连进样,共有峰的相对保存时刻RSD<1.65%,相对峰面积RSD<2.78%,成果标明重现性杰出。

2.6 余甘子叶HPLC指纹图谱及技术参数

2.6.1 指纹图谱挑选及特征峰的标定测定10批余甘子叶88 min内指纹图谱,取得15个共有峰,由指纹图谱能够看出1号峰峰面积积分百分比较大,别离度及峰形较好,因而挑选1号峰作为参照峰,标号为S,其他特征峰顺次标号为S,2,3,……,15。选用国家药典委员会公布的《中药色谱指纹图谱类似度点评体系A版》核算机软件对10批余甘子叶图谱进行处理得到规范指纹图谱(图1)和指纹图谱纵向叠加图(图2)。

图1 余甘子叶规范HPLC指纹图谱

图2 10批余甘子叶的HPLC指纹图谱纵向叠加图

2.6.2 余甘子叶指纹图谱特征峰相对保存时刻和相对峰面积的断定选用10批余甘子叶的指纹图谱,选用1号峰作为参照峰,选取10批样品的共有峰共15个,核算相对保存时刻(表3)和相对峰面积(表4)。

2.6.3 指纹图谱类似度的核算选用《中药色谱指纹图谱类似度点评体系A版》核算机软件对10批余甘子叶指纹图谱进行处理得到指纹图谱类似度剖析成果。10批次不同产地余甘子叶样品的HPLC指纹图谱与对照指纹图谱的类似度核算成果均>0.9,别离为0.966、0.969、0.973、0.981、0.931、0.902、0.963、0.955、0.983、0.974,标明各批次余甘子叶药材与对照指纹图谱有较好的共同性。

3 评论

余甘子叶药材的成分杂乱,本文通过调理活动相洗脱程序,使各成分在整个剖析时刻段内充沛别离洗脱。在活动相体系的挑选,本文调查了乙腈-水、甲醇-水、乙腈-磷酸、甲醇-磷酸体系,成果标明各成分在乙腈-水、甲醇-水中无法别离,峰形差。在酸性活动相中,磷酸可改进其别离度与峰形,比照甲醇-磷酸体系、乙腈-磷酸,前者洗脱才能较弱,各组分出峰时刻太慢,色谱图基线漂移,不能到达中药指纹图谱色谱峰基线别离的要求,故本文选用乙腈-磷酸体系。通过屡次优化发现在100 min内能较好地别离余甘子叶中各组分,重现性杰出。

本文调查了三种不同的色谱柱对指纹图谱的影响,成果标明,同一色谱办法,不同色谱柱,会发生不同的别离效果,使得某些成分无法到达基线别离,一起,对柱效、峰形也有不同程度的影响。美国热电BDS色谱柱在试验过程中能使各首要有用成分有较好的别离效果,故本文挑选了美国热电BDS色谱柱。

余甘子叶中已知成分有没食子酸、槲皮素,两者最大吸收波长为270 nm和370 nm,本文根据此特色,用二极管阵列检测器,别离在210、218、258、270、280、300、360 nm检测色谱图,并一起取得全波长三维色谱图,成果标明218 nm的色谱图能给出最多峰信息,故本文终究选定218 nm为检测波长。

试验成果显现,10批指纹图谱中首要峰群的全体图貌根本共同,但各成分的共有色谱峰峰面积存在必定差异。此研讨为快速辨别和区别不同来历的余甘子叶以及进一步对其进行全面质量操控研讨供给了科学的根据,一起关于余甘子叶药材的选购和用药具有必定的指导效果。

[参考文献]

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[5]钟振国,曾春兰.余甘子叶提取物体外抗菌试验研讨[J].中药材,2008,31(3):428.

[6]曾春兰,钟振国.余甘子叶提取物体外抗肿瘤效果研讨[J].时珍国医国药,2008,19(3):580.

[7]潘国庆,赵旭升,蒋炘治.余甘子抗氧化效果的研讨[J].青海科技,2007,12(6):33.

[8]王绿娅,王大全,秦彦文,等.余甘子抗脂质过氧化和维护血管内皮的试验研讨[J].我国药学杂志,2003,38(10):505.

[9]刘丽梅,高政,李宝文.余甘子对试验性颈动脉粥样硬化家兔的影响[J].我国临床恢复,2003,7(5):766.

[10]黄正昌,邓学龙,朱宇同,等.台湾细叶油柑体内外抗乙肝病毒效果研讨[J].广州中医药大学学报,2000,17(3):260.

[11]李萍,谢金鲜,林启云.民族药余甘子对D2半乳糖胺所造成的小鼠急性肝损害的影响[J].我国民族民间医药杂志,2003,12(3):161.

[12]罗春丽.余甘子对肿瘤细胞抑制效果及免疫调理的研讨[J].我国试验方剂学杂志,2010,16(13):155.

[13]崔炳权,何震宇,杨泽民,等.余甘子提取物对小鼠免疫功用的影响[J].时珍国医国药,2010,21(8):1920.

[14]陈国珍,张颖君,蔡文锋,等.余甘子中水解单宁类化合物体外抗氧化活性研讨[J].我国药理通讯,2003,20(1):5.

[15]梁臣艳,甄汉深,刘振杰,等.广西余甘子叶醋酸乙酯部位化学成分的研讨[J].中成药,2009,31(5):761

[16]刘晓丽,赵谋明.余甘子果汁活性成分与抗氧化活性研讨[J].食物与发酵工业,2006,23(5):151.

(收稿日期:2014-03-08本文修改:郭静娟)

2.5.2 安稳性试验取批号为200701药材,制备供试品溶液,别离在0、4、8、12、16、24 h进样检测共有峰的相对保存时刻RSD<1.30%,相对峰面积RSD<2.47%,成果标明,常温下样品溶液在24 h内安稳性杰出。

2.5.3 重重复性试验精细称取批号为200701药材5份,制备供试品溶液,接连进样,共有峰的相对保存时刻RSD<1.65%,相对峰面积RSD<2.78%,成果标明重现性杰出。

2.6 余甘子叶HPLC指纹图谱及技术参数

2.6.1 指纹图谱挑选及特征峰的标定测定10批余甘子叶88 min内指纹图谱,取得15个共有峰,由指纹图谱能够看出1号峰峰面积积分百分比较大,别离度及峰形较好,因而挑选1号峰作为参照峰,标号为S,其他特征峰顺次标号为S,2,3,……,15。选用国家药典委员会公布的《中药色谱指纹图谱类似度点评体系A版》核算机软件对10批余甘子叶图谱进行处理得到规范指纹图谱(图1)和指纹图谱纵向叠加图(图2)。

图1 余甘子叶规范HPLC指纹图谱

图2 10批余甘子叶的HPLC指纹图谱纵向叠加图

2.6.2 余甘子叶指纹图谱特征峰相对保存时刻和相对峰面积的断定选用10批余甘子叶的指纹图谱,选用1号峰作为参照峰,选取10批样品的共有峰共15个,核算相对保存时刻(表3)和相对峰面积(表4)。

2.6.3 指纹图谱类似度的核算选用《中药色谱指纹图谱类似度点评体系A版》核算机软件对10批余甘子叶指纹图谱进行处理得到指纹图谱类似度剖析成果。10批次不同产地余甘子叶样品的HPLC指纹图谱与对照指纹图谱的类似度核算成果均>0.9,别离为0.966、0.969、0.973、0.981、0.931、0.902、0.963、0.955、0.983、0.974,标明各批次余甘子叶药材与对照指纹图谱有较好的共同性。

3 评论

余甘子叶药材的成分杂乱,本文通过调理活动相洗脱程序,使各成分在整个剖析时刻段内充沛别离洗脱。在活动相体系的挑选,本文调查了乙腈-水、甲醇-水、乙腈-磷酸、甲醇-磷酸体系,成果标明各成分在乙腈-水、甲醇-水中无法别离,峰形差。在酸性活动相中,磷酸可改进其别离度与峰形,比照甲醇-磷酸体系、乙腈-磷酸,前者洗脱才能较弱,各组分出峰时刻太慢,色谱图基线漂移,不能到达中药指纹图谱色谱峰基线别离的要求,故本文选用乙腈-磷酸体系。通过屡次优化发现在100 min内能较好地别离余甘子叶中各组分,重现性杰出。

本文调查了三种不同的色谱柱对指纹图谱的影响,成果标明,同一色谱办法,不同色谱柱,会发生不同的别离效果,使得某些成分无法到达基线别离,一起,对柱效、峰形也有不同程度的影响。美国热电BDS色谱柱在试验过程中能使各首要有用成分有较好的别离效果,故本文挑选了美国热电BDS色谱柱。

余甘子叶中已知成分有没食子酸、槲皮素,两者最大吸收波长为270 nm和370 nm,本文根据此特色,用二极管阵列检测器,别离在210、218、258、270、280、300、360 nm检测色谱图,并一起取得全波长三维色谱图,成果标明218 nm的色谱图能给出最多峰信息,故本文终究选定218 nm为检测波长。

试验成果显现,10批指纹图谱中首要峰群的全体图貌根本共同,但各成分的共有色谱峰峰面积存在必定差异。此研讨为快速辨别和区别不同来历的余甘子叶以及进一步对其进行全面质量操控研讨供给了科学的根据,一起关于余甘子叶药材的选购和用药具有必定的指导效果。

[参考文献]

[1]卫生部药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:我国医药科技出书社,2010:167.

[2]王辉.余甘子的化学成分和药理效果研讨进展[J].我国现代中药,2011,13(11):52.

[3]周涛,邱德文.民族药余甘子的本草药学概略[J].贵阳中医学院学报,2002,24(3):3.

[4]罗兰.闽药余甘子药理效果及提取别离办法研讨进展[J].海峡药学,2013,25(11):18

[5]钟振国,曾春兰.余甘子叶提取物体外抗菌试验研讨[J].中药材,2008,31(3):428.

[6]曾春兰,钟振国.余甘子叶提取物体外抗肿瘤效果研讨[J].时珍国医国药,2008,19(3):580.

[7]潘国庆,赵旭升,蒋炘治.余甘子抗氧化效果的研讨[J].青海科技,2007,12(6):33.

[8]王绿娅,王大全,秦彦文,等.余甘子抗脂质过氧化和维护血管内皮的试验研讨[J].我国药学杂志,2003,38(10):505.

[9]刘丽梅,高政,李宝文.余甘子对试验性颈动脉粥样硬化家兔的影响[J].我国临床恢复,2003,7(5):766.

[10]黄正昌,邓学龙,朱宇同,等.台湾细叶油柑体内外抗乙肝病毒效果研讨[J].广州中医药大学学报,2000,17(3):260.

[11]李萍,谢金鲜,林启云.民族药余甘子对D2半乳糖胺所造成的小鼠急性肝损害的影响[J].我国民族民间医药杂志,2003,12(3):161.

[12]罗春丽.余甘子对肿瘤细胞抑制效果及免疫调理的研讨[J].我国试验方剂学杂志,2010,16(13):155.

[13]崔炳权,何震宇,杨泽民,等.余甘子提取物对小鼠免疫功用的影响[J].时珍国医国药,2010,21(8):1920.

[14]陈国珍,张颖君,蔡文锋,等.余甘子中水解单宁类化合物体外抗氧化活性研讨[J].我国药理通讯,2003,20(1):5.

[15]梁臣艳,甄汉深,刘振杰,等.广西余甘子叶醋酸乙酯部位化学成分的研讨[J].中成药,2009,31(5):761

[16]刘晓丽,赵谋明.余甘子果汁活性成分与抗氧化活性研讨[J].食物与发酵工业,2006,23(5):151.

(收稿日期:2014-03-08本文修改:郭静娟)

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毛健+++刘振杰[摘要]意图树立余甘子叶的指纹图谱。办法选用高效液相色谱法测定,乙腈-0.1%磷酸溶液梯度洗脱,流速1.0ml/min,柱温25℃,紫外检测波长218nm。成果余甘子叶中有15个共有峰被断定为指纹峰,选用《中药色谱指纹图谱类似度点评体系A版》核算机软件点评10批余甘子叶指纹图谱的类似性,其成果均>0.9。定论该办法简