人工牛黄甲硝唑片 RP—HPLC法测定人工牛黄甲硝唑胶囊中甲硝唑的溶出度

秦松　张蓓

【摘要】意图树立RP-HPLC法对人工牛黄甲硝唑胶囊中甲硝唑溶出度的测定办法。办法选用C₁₈色谱柱，甲醇-水（20：80）为活动相，流速：1.0mL/min，检测波长320nm，柱温35℃。成果甲硝唑进样量在0.4～4.0μg范围内呈杰出线性关系，r=0.9999，均匀收回率为99.45%，RSD为0.46%（n=6）；3批次样品溶出度查看成果杰出。定论本法简略、精确、重现性高、专特点强，契合溶出度办法的树立准则，可用于人工牛黄甲硝唑胶囊中甲硝唑溶出度的测定。

【关键词】人工牛黄甲硝唑胶囊；RP-HPLC法；甲硝唑；溶出度

【中图分类号】R927 【文献标识码】B 【文章编号】2095-0616（2015）21-48-04

人工牛黄甲硝唑胶囊为复方制剂，曾用名是牙痛安胶囊，首要成分是甲硝唑和人工牛黄，外加淀粉和胶囊壳等辅料组成，其间甲硝唑是对大多数厌氧菌有显着抗炎作用，而人工牛黄起解热抗炎作用，其制剂是临床常用的一种抗厌氧菌药物，用于医治急性智齿冠周炎、部分牙槽脓肿、牙髓炎、根尖周炎等有明显作用。甲硝唑在此复方制剂的抗炎作用中起首要作用，一起溶出度作为药品质量的重要参阅目标，而目前我国国家药品规范中未收载其溶出度的查看项目。所以，为了有用操控药品质量，本研讨选用RP-HPLC法对人工牛黄甲硝唑胶囊中甲硝唑的溶出度测定办法进行查核。

1仪器与资料

1.1仪器

安捷伦1260型高效液相色谱仪（美国安捷伦）；CPA225D型电子天平（德国赛多利斯）；RCZ-8M型溶出实验仪（天津市天大天发科技有限公司）

1.2试药

人工牛黄甲硝唑胶囊（市售品，规范：甲硝唑0.2g、人工牛黄5mg，ABC三个出产企业与批号别离为：靖宇天池制药有限公司，20131106、新乡恒久远药业有限公司，20130705），重庆迪康长江制药有限公司，140226）；甲醇为一级色谱纯（美国六合，1410106）；盐酸为剖析纯（洛阳市化学试剂厂，140606）；水为高纯水（克己）。

1.3对照品

甲硝唑对照品批号为100191-201507，来历为我国食品药品检定研讨院，其含量为100%。

2办法与成果

2.1色谱条件

色谱柱：Agela Promosil C₁₈柱（4.6 mm×250mm，5μm）；活动相：甲醇-水（20：80）；检测波长：320nm；流速：1.0mL/min；柱温：35℃；进样量：10μL；在此色谱条件下，理论板数按甲硝唑峰核算不低于2000。

2.2溶液制备

取人工牛黄甲硝唑胶囊各1粒，用盐酸溶液（9→1000）溶解后，稀释至900mL，摇匀，经0.45μm滤膜过滤，即得供试品溶液。精细称取甲硝唑对照品20.00mg置100mL容量瓶中，用盐酸溶液（9→1000）溶解后，稀释至刻度，即得对照品溶液（0.2000mg/mL）。取空白胶囊壳1粒，参加按处方份额称取的1粒胶囊量的淀粉辅料和人工牛黄约5mg，然后按供试品溶液的制备办法制造成阴性对照溶液。

2.3体系适用性实验

在上述色谱条件下，别离取上述制备的对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液注入色谱仪，记载色谱图，见图1。甲硝唑峰保存时刻为8.51min，在此时刻对照品溶液和供试品溶液均呈现甲硝唑色谱峰，而阴性对照溶液则在此时刻段未呈现搅扰吸收峰，标明在本实验条件下处方中其他成分对测定无影响。

2.4办法学调查

规范曲线制作：在上述色谱条件下，精细汲取上述对照品溶液2、5、10、15、20μL，注入液相色谱仪，测得峰面积。以对照品峰面积Y为纵坐标，以折算后按20¨L进样量的对照品溶液浓度X（μg/mL）为横坐标（别离为20、50、100、150、200μg/mL），进行线性回归，得回归方程为Y=29.680X+1.226，r=0.9999。成果标明，甲硝唑进样量在0.4～4.0μg范围内与峰面积有杰出线性关系。

精细度实验：取对照品溶液按上述色谱条件接连进样6次，测定甲硝唑的峰面积，成果甲硝唑峰面积的RSD为0.32%（n=6），标明该办法的精细度杰出。

安稳性实验：取供试品溶液别离在制造完成后室温放置0、4、8、12和16h时进样，测得峰面积RSD为0.45%（n=5），标明供试品溶液在16h内安稳。

加样收回实验：精细称取甲硝唑对照品20.00mg置50mL容量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）适量溶解后稀释至刻度，摇匀后作为对照品贮备溶液（0.4000mg/mL）。精细量取6份已知质量浓度的供试品溶液（0.1947 mg/mL）各5mL，别离置6个10mL容量瓶，再精细量取对照品贮备溶液（0.4000mg/mL）1mL、2mL和3mL各2份别离置上述6个10mL容量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度并摇匀，别离进样测定含量，核算收回率，成果见表1。

2.5溶出度测定和溶出曲线的制作

按《我国药典2010年版（二部）》的附录XC第二法（桨法）操作。量取经脱气处理的盐酸溶液（9→1000）900mL，倒入溶出杯，待恒温至（37℃±0.5℃），以转速50r/min发动溶出仪，取人工牛黄甲硝唑胶囊1粒装入沉降篮，投入溶出杯中并开端计时，别离在第5、10、20、30、40、50分钟时刻点取溶液5mL，用0.45μm滤膜过滤后进样测定，并在每次取样后当即弥补相同温度相同体积的盐酸溶液（9→1000）。经本文的RP-HPLC法测定后核算各时刻点的累计溶出百分率，成果见表2。将表2的数据以时刻为横坐标、累积溶出百分率为纵坐标，制作成溶出曲线。成果见图2。由溶出曲线可见，样品在30min时甲硝唑的溶出量到达了90%以上，依照口服制剂溶出度的要求，参阅甲硝唑片已有的国家规范的溶出度要求，考虑甲硝唑的体外一体内相关性及不同企业工艺的影响，可断定取样时刻为30min，极限为标明量的80%较为适宜。

2.6批次样品的溶出度查看

别离取3批次样品，照上述2.5的办法操作，在30min时取样5mL，经0.45μm滤膜过滤后进样测定其溶出度。成果见表3。从3批次样品的查看成果可见，此办法测得的成果安稳牢靠，溶出度成果杰出。

3评论

3.1溶出条件的挑选

在溶出办法的挑选上，一般常用转篮法和桨法，因实验药品为胶囊剂，在运用转篮法时转篮易被胶囊碎片阻塞，影响药物溶出，因而挑选桨法；但因溶出进程胶囊会浮于液面而影响溶出，所以还需要运用沉降篮；桨法常用的转速为50～75r/min，但考虑到为确保药品质量，以便对胃动力削弱的患者也能有较好的医治作用，故选用转速50f/min。在溶出介质的挑选上，因人工牛黄甲硝唑胶囊是一种胃溶型制剂，所以挑选盐酸溶液（9→1000）作为溶出介质，这与其现行规范的含量测定项溶剂共同。

3.2检测条件的挑选

据有关研讨的文献报导甲硝唑所用检测波长有277nm、318nm、320nm、390nm，经比较后挑选320nm波长较为抱负，与甲硝唑各制剂的现行国家检测规范共同。在活动相的挑选上，挑选了不同份额的甲醇-水，并与文献报导的活动相进行比较，成果显现甲醇-水（20：80）的活动相成本低，易制造，所得的色谱图峰形及体系适用性也很好。

3.3本研讨办法的长处

上述实验及一些文献资料标明，不同厂家出产的人工牛黄甲硝唑胶囊溶出速率存在必定不同，可见在制剂出产工艺上有较大差异。溶出度作为制剂质量操控的一种办法，其意图就是使不同企业出产的同一种类能到达必定程度的生物等效。经本文的实验验证，RP-HPLC法测定人工牛黄甲硝唑胶囊中甲硝唑的溶出度，办法简略、精确、重现性高、专特点强，可作为人工牛黄甲硝唑胶囊质量点评与操控的有用手法。endprint