心力衰竭和血压的联系 microRNA—138与心力衰竭联系的研讨

伏继伟　孙志军

[摘要]意图 研讨microRNA-138在心力衰竭患者血清中的表达水平。办法 挑选2015年1～3月朝阳市中心医院心内科住院的48例心力衰竭患者（心力衰竭组），病况严峻程度按NYHA心功用分级分为Ⅱ～Ⅳ级，别的选取同期心内科住院的40例非心力衰竭患者（对照组），选用荧光定量PCR法测定血清microRNA-138的表达水平。契合Framingham心力衰竭确诊规范的患者均可人心力衰竭组。成果 心力衰竭患者血清microRNA-138表达水平较非心力衰竭患者升高，差异有统计学含义（P<0.05），且随NYHA心功用分级的添加而升高。将血清miR-138水平与临床常用心功用点评目标作相关性剖析，成果显现，心力衰竭组患者血清miR-138水平与氨基结尾脑钠肽前体（NT-proBNP）水平呈正相关（P<0.05），与左室射血分数（LVEF）值呈负相关（P<0.01），miR-138确诊心力衰竭的ROC曲线下面积为0.81。定论 microRNA-138可作为确诊心力衰竭、风险分层、效果及预后的一个客观生物标志物。

[关键词]microRNA-138；心力衰竭；血清

[中图分类号]R54 [文献标识码]A [文章编号]2095-0616（2016）06-19-03

心力衰竭（HF）是各种心脏结构或功用性疾病导致心室充盈和（或）射血功用受损，心排血量不能满意机体安排代谢需求，以肺循环和（或）体循环淤血，器官、安排血液灌注缺乏为临床体现的一组综合征。他是一种严峻危害人们健康的疾病，是绝大多数心血管疾病的归结。心肌梗死、高血压、主动脉狭隘、瓣膜病变等心脏疾病都会形成血液动力学及神经内分泌的改动，而这些改动往往会引起心肌细胞内分子通路或搬运通路的病理性改动，在压力负荷的效果下心脏往往体现为肥壮，心肌重塑等改动。心脏重构是心力衰竭的根本机制，也是HF开展的病理生理学根底。跟着对心衰发病机制知道的不断深入，人们发现microRNA在心力衰竭的病理生理中起至关重要的效果，在心力衰竭的确诊、病况及治效果果的点评、预后方面均有重要价值。MicroRNA（miRNA）是一类约由19～25个核苷酸组成内源性非编码RNA。可经过序列特异性序列特异性的办法来调理特异基因的表达，其参加了细胞成长、分解、凋亡、代谢等简直一切的生物进程。最近发现，microRNA安稳的存在于外周血中，可作为疾病的生物标志物。近年来多项研讨已标明，心力衰竭中能够检测到多种miRNA水平的改动。本研讨评论心力衰竭患者与对照组非心力衰竭患者血清miRNA-138表达水平的差异。

1.材料与办法

1.1一般材料

挑选2015年1～3月朝阳市中心医院心内科住院的50～75岁的48例心力衰竭患者为研讨目标。各种原因导致心力衰竭并契合Framingham心力衰竭确诊规范的患者均可人心力衰竭组，其病况严峻程度按纽约心脏学会（NYHA）心功用分级规范，其间NYHAⅡ、Ⅲ、Ⅳ级各16例；另选取非心力衰竭患者（对照组）为同期心内科的40例住院患者，既往无心力衰竭病史，临床材料查看无心力衰竭体现。Framingham确诊心力衰竭的首要规范为：阵发性夜间呼吸困难；颈静脉怒张；肺哕音；心脏扩展；急性肺水肿；第三心音奔马律；静脉压增高（>16cm H2O）。非必须规范：踝部水肿；夜间咳嗽；活动后呼吸困难；肝肿大；胸腔积液，肺活量下降至最大肺活量的1/3；心动过速（>120次/min）。首要或非必须规范包含：医治5d以上时刻后体质量减轻≥4.5kg。契合二项首要规范，或契合一项首要规范及二项非必须规范者可建立确诊。纽约心脏学会（NYHA）心功用分级规范：I级膂力活动不受，一般膂力活动不引起过度的乏力、心悸或气促；Ⅱ级膂力活动轻度受限，歇息时无不适，日常活动量可致乏力、心悸或气促；Ⅲ级膂力活动显着受限，歇息时无不适，但低于日常活动即可引起上述症状；Ⅳ级不能无症状地进行任何膂力活动，歇息时可有症状，任何膂力活动都加剧不适。

1.2办法

入院次日晨空腹采肘正中静脉血，查看NT-proBNP、TNT、心肌酶、血常规、肝功用、肾功用、心脏五颜六色超声及射血分数，并留取5mL静脉血依照RNA提取试剂盒的阐明离心取血清，贮存于-80%冰箱中备用。血清microRNA-138的检测用实时PCR法检测提取的RNA的表达量。从留取的样本血清中提取富含miRNA的总RNA，在样品中参加5nmol/L的U6作为内参。用2（-△）办法得出miRNA的相对表达量，△Ct=Ctmax-Ctmax

1.3统计学处理

选用SPSS19.0软件，计量材料以（x±s）标明，两组间比较选用t查验，选用ROC曲线剖析miR-138在心力衰竭中的确诊价值，以P<0.05为差异有统计学含义。

2.成果

心力衰竭组血清miR-138的相对表达量以及各临床生化目标，见表1，按不同NYHA心功用分级别离与对照组两两比较，差异有统计学含义（P<0.05）。正态分布材料间的相关性选用直线相关性剖析，非正态分布材料间的相关性选用秩相关剖析。

2.1不同NYHA分级组与对照组研讨目标临床生化目标比较

与对照组比较，不同NYHA心功用分级的心力衰竭组患者的血清miR-138及NT-proBNP水平升高，LVEF下降，差异具有统计学含义（P<0.05），而WBC、ALT、Cr差异无统计学含义（P>0.05）c见表1。

2.2血清microRNA-138与研讨目标的临床材料相关性剖析

依据表2反映心力衰竭组血清microRNA-138与临床常用心功用点评目标LVEF及NT-proBNP的联系，与前者呈负相关，与后者呈正相关。

2.3 microRNA-138在心力衰竭中的确诊价值

依据ROC曲线，miR-138确诊心力衰竭的曲线下面积AUC为0.81（95%CI：0.68～0.92），能够供给中等的确诊参考价值。

3.评论

2013年我国心血管病陈述指出，35～74岁人群心力衰竭患病率为0.9%，跟着年纪的添加，心力衰竭患病率敏捷添加，虽然心力衰竭的医治有了非常大的开展，但逝世数仍在敏捷添加。跟着对心衰发病机制知道的不断深入，生物符号物在心衰前期确诊、风险分层、预后点评及医治战略方面的使用价值，已成为近年心血管疾病研讨范畴的热门之一。血清microRNA作为确诊和判别预后的分子标志物已越来越受到重视。有研讨标明，micmRNA可安稳存在于外周血中，这是抱负的疾病符号物的特征之一。Chen等报导，在将血清煮沸，或许参加强酸、强碱、RNA酶、DNA酶等多种恶劣情况下，血清中miRNA含量仍坚持相对安稳。本研讨正是根据microRNA的这个特征来研讨miR-138与心力衰竭的联系。一些血清microRNA已被证明能够作为心血管疾病的分子标志物，如miR-1、miR-133a和miR-208a可作为急性心肌梗死患者的确诊标志物。现在很多的研讨标明，miRNA与心脏疾病有着亲近的相关性，2005年DRZhao首要发现miRNA-1-2特定性在心脏中存在并经过Hand2通道起效果，环绕miRNA的心脏效果的研讨由此打开。迄今为止已发现miRNA在心肌肥壮，心肌梗死后心律失常中起效果，并参加心肌的凋亡，其间miR-1、195、212、208、133等现已被证明经过不同的分子通路在上述的各个方面起效果。跟着miRNA微阵列技能的开展，进一步证明多种miRNA参加了心脏病理性肥壮及心力衰竭的发作。van Rooij等经过miRNAs微阵列技能检测发现在TAC（缩窄小鼠的主动脉弓诱导心肌肥壮模型）小鼠及calcineurin蛋白转基因小鼠中，有21种miRNAs表达上调，7种miRNAs表达下调。

许多miRNA在心力衰竭心肌细胞凋亡、心室重构的信号转导进程中都有必定的调理效果，且心力衰竭患者中还可检测到一些miRNA水平的改动，miR-1、miR-29、miR-30、miR-133、miR-150、miR-7、miR-378等是下调的，而miR-23a、miR-125、miR-146、miR-195、miR-199、miR-214、miR-181b等是上调的，这些miRNA从分子机制上影响心力衰竭的发作、开展进程；在心衰前期，这四种miRNA的改动可引起信号通路紊乱。

本研讨成果标明心力衰竭患者的血清miR-138表达水平较非心力衰竭者增高，不同NYHA分级心力衰竭组中血清miR-138水平较对照组高，且随NYHA心功用分级添加而升高，因miR-138是心肌肥壮和心力衰竭的正性调理因子，当心力衰竭病况越严峻时其心肌细胞中miR-138含量越高，开释进入外周血的量也随之增大，这或许是血清miR-138水平随NYHA分级添加而升高的原因之一。别的，miR-138与现在临床常用心功用点评目标具有较好的相关性，如与氨基结尾脑钠肽前体（NT-proBNP）水平呈正相关，与左室射血分数（LVEF）值呈负相关，提示miRNA-138或许参加了心力衰竭的病理生理进程，由衰竭的心肌细胞开释然后进入血液循环之中。其确诊心衰的ROC曲线下面积AUC为0.81，也阐明对确诊有参考价值。综上所述血清microRNA-138水平可用作点评心力衰竭病况严峻程度的一个客观生物标志物。