膝骨性关节炎 膝骨性关节炎患者关节液中MMP—7、MMP—9、TIMP—1、TNF—α的表达及含义

鲁海　卢超　张嘉良　刘文刚　倪新玲

[摘要]意图调查并讨论膝关节骨性关节炎患者膝关节液中MMP-7、MMP-9、TIMP-1、TNF-α水平与病变程度的联系。办法膝关节骨性关节炎患者97例，依据患者的X线片，把OA的严峻程度分为0～Ⅳ级，并进行WOMAC骨关节炎指数评分，检测膝关节液中MMP-7、MMP-9、TIMP-1蛋白表达量及TNF-α水平，以健康志愿者10例为正常对照组。成果骨性关节炎患者膝关节液中MMP-7、MMP-9、TIMP-1、TNF-α水均匀高于正常对照组（P<0.05），跟着病变程度加剧，膝关节液中MMP-7、MMP-9、TIMP-1、TNF-α水平显着添加。定论MMP-7、MMP-9、TIMP-1、TNF-α水平在骨性关节炎患者膝关节液中均升高，与病变程度亲近相关，检测这些目标有助于对膝关节骨性关节炎病况的判别。

[关键词]骨性关节炎；膝关节；基质金属蛋白酶；肿瘤坏死因子α

[中图分类号]R684 [文献标识码]A [文章编号]2095-0616（2015）22-11-05

膝关节骨性关节炎（KOA）是一种多见于中老年人的多发病、常见病。它的病理特征是膝关节软骨不断褪变、软骨下骨的病变、骨赘逐步构成的退行性骨关节病变。可是，迄今为止，其详细的发病机理依然没有说明。近年来，国内外很多研讨发现基质金属蛋白酶（MMPs）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达及活性与OA发病机制之间存在着亲近的联系。现在关于MMP-7、MMP-9在骨性关节炎患者中的表达研讨较少。因而，在本研讨中，咱们研讨各个阶段膝关节骨性关节炎的临床表现、相关的分子生物学代谢的改动，以寻觅痛苦、生硬、活动功用等临床目标基质金属蛋白酶-7、-9、TNF-α、TIMP1等目标的相关性，然后客观评价MMP-7、MMP-9、TIMP1、TNF-α和以及WOMAC骨关节炎指数在骨性关节炎确诊中的含义及价值，然后为找到前期、灵敏、精确的膝关节骨性关节炎的确诊办法而做出探究。

1材料与办法

1.1一般材料

1.1.1骨性关节炎组

共97例，病例均来源于2013年10月～2014年3月就诊于广东省第二中医院骨伤一科门诊及住院部的患者，均契合骨性关节炎的确诊规范。依据患者的x线片，以Kellgren和Lawrence印象学分级量化规范，把OA的严峻程度分为0～Ⅳ级：0级，正常；Ⅰ级，关节腔空隙≥7mm，关节外表骨赘构成；Ⅱ级，关节腔空隙4～7mm，有显着骨赘；Ⅲ级，关节腔空隙≤4mm，有中等量骨赘；Ⅳ级，关节腔空隙消失，有很多骨赘。当选患者97例，其间Ⅰ级者33例，Ⅱ级者28例，Ⅲ级者20例，Ⅳ级者16例。

1.1.2正常人组

共10例，来源于2013年10月～2014年3月于广东省第二中医院骨伤一科门诊自愿承受膝关节液查看的健康体检者。无关节炎和其他感染性疾病，肝肾功用等目标均正常。

1.2确诊规范

1.2.1西医确诊规范西医确诊规范参照1995年美国风湿病学院引荐的膝关节骨关节炎的确诊规范。

1.2.2印象学分级选用Kellgren和Lawrence印象学分级量化规范。

1.2.3膝骨关节炎临床严峻度分级选用、美国西部Ontario和McMaster大学骨关节炎指数评分（WOMAC骨关节炎指数评分）。包含痛苦、僵直、进行日常活动的难度，共三方面症状评分，以3项评分之和为WOMAC骨关节炎总指数。

1.3归入规范

（1）年纪在40～70岁。（2）契合上述确诊规范。（3）扫除兼并有其他系统疾病者。（4）对研讨含义有正确认识，有杰出的依从性者，并签署知情同意书。

1.4扫除规范

（1）患者年纪在35岁以下或许在69岁以上者。（2）不契合骨性关节炎确诊规范者。（3）妊娠或哺乳期妇女。（4）兼并有重要脏器功用障碍及精神病患者等。（5）兼并骨结核等骨病以及急性伤口等患者。（6）膝关节感染、皮肤破损、溃烂等不适应进行关节穿刺者。（7）不能合作研讨或不同意参与本研讨者。（8）正在参与其他临床试验的患者。

1.5研讨办法1.5.1调查内容（1）一般材料：受试者名字、年纪、性别、病程等。（2）膝关节印象学特色：膝X线特色，膝关节部分状况和全身的状况。（3）WOMAC骨关节炎指数评分（包含痛苦、生硬、进行日常活动的难度）。（4）关节液中MMP-7、MMP-9、TIMP-1及TNF-α的含量。

1.5.2首要的试验仪器设备及试剂

酶标仪（芬兰，MK352型），冷冻高速离心机（SIGMA），ELISA试剂盒（美国R&DSystems公司）等。

1.5.3标本（关节液）的收集与保存受试者选用仰卧位，膝关节伸直体位放置，取大腿股四头肌外侧缘与髌骨上缘连线交汇处作为穿刺点，75%医用乙醇惯例消毒穿刺部位，选用5mL注射器进行穿刺，当穿刺针头进入膝关节腔内，感觉有失败感时，抽取膝关节液0.5～2mL，注入含肝素试管内。收集标本后2h内，离心，快速冷冻，置于-80%超低温冰箱保存。

1.5.4含量测定选用双抗体夹心法测定基质金属蛋白酶及金属蛋白酶安排按捺因子（MMP-7、MMP-9、TIMP-1）的含量；选用双抗夹心ABC-ELISA法测定膝关节液TNF-α的含量。严厉按试剂盒说明书过程进行。

1.6计算学办法

选用计算软件SPSS13.0处理所得数据，计量材料用（x±s）表明，选用成组t查验剖析OA患者及健康对照组MMPs、TIMP-1蛋白及其比值等目标的差异；WOMAC骨关节炎指数分级与MMPs、TIMP-1蛋白及其比值等目标的相关性、x线等级与关节液中MMPs、TIMP-1蛋白及其比值等目标的相关性用Spearman相关的计算剖析，以P<0.05为差异有计算学含义。