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血凝实验:血凝实验的影响要素剖析

[摘要]近年来,跟着查验医学的不断发展,各种先进的全自动血凝剖析仪在各级医院遍及运用,使血浆凝血试验的检测愈加趋于规范化、标准化,不同医院之间血凝试验成果的可比性日益进步,在出血与血栓性疾病的筛查、确诊及抗凝和溶栓医治的药物监测方面发挥了重要效果。血浆凝血试验不同于其他查验项目,影响要素许多,且具有特

[摘要] 近年来,跟着查验医学的不断发展,各种先进的全自动血凝剖析仪在各级医院遍及运用,使血浆凝血试验的检测愈加趋于规范化、标准化,不同医院之间血凝试验成果的可比性日益进步,在出血与血栓性疾病的筛查、确诊及抗凝和溶栓医治的药物监测方面发挥了重要效果。血浆凝血试验不同于其他查验项目,影响要素许多,且具有特殊性,一旦凝血途径进程中的某些凝血因子被发动,就会发作一系列连锁反响,导致试验成果呈现极大误差,这些影响要素大多会集在检测剖析前,因而关于试验室工作人员和临床医护人员来说应该把握和了解这些影响要素,才干有用防止其对试验成果的搅扰,确保检测成果的精确牢靠。

[关键词] 血凝试验;标本;影响要素

[中图分类号] R446.11[文献标识码] B[文章编号] 1674-4721(2014)05(a)-0137-03

The influence factor analysis of hemagglutination test

ZHENG Hong-tu

Department of Laboratory,Central People′s Hospital of Siping City in Jilin Province,Siping 136000,China

[Abstract] Recent years,with the continuous development of laboratory medicine,all kinds of advanced full-automatic blood coagulation analyzer in levels of hospitals of general application,which is made the detection of plasma hemagglutination test more standardization,standardization,with the increasing in results comparable of blood hemagglutination test between different hospitals day by day,which is played an important role in hemorrhagic and thrombotic disease screening,diagnosis and anticoagulant therapy,drug monitoring in thrombolytic therapy.Plasma coagulation experiment of many influence factors and particularity,that is different from other inspection items,a series of chain reaction occurs once some clotting factors in the process of coagulation pathway was started,the reactions lead to a great deviation in test results,and these factors affecting mostly ocured before the analysis,so these factors should be grasped and understanded by the laboratory staff and clinical medical and nursing staff,in order to avoid the interference of these factors on the test results and to ensure the test results accurate and reliable.

[Key words] Hemagglutination test;Specimen;Influence factor

血凝试验是临床工作中常用的检测项目,血凝试验成果的精确性是辅导临床正确医治的确保。影响血凝试验的要素许多,这要求试验室工作人员有必要了解和把握与之相关的要素,然后有用防止其对试验成果的影响,现就首要相关要素进行讨论。

1 标本收集

正确收集标本是取得精确查验成果的条件,血凝试验的标本收集,有必要依照规则的办法,保存凝血因子的悉数特性,严厉防止凝血因子和血小板在采血进程中被激活。

1.1 合理选用注射器和试管

采血时运用硅化或塑料注射器,试管用带盖的硅化玻璃试管或塑料试管,由于无盖会使血液二氧化碳丢掉,pH值增高,使血浆凝血酶原时刻(PT)和活化部分凝血活酶时刻(APTT)延伸。试管不能用一般玻璃试管,一般玻璃能引起内源性凝血体系激活,影响最大的是Ⅷ因子的活性,可使其显着下降。

1.2 正确运用止血带

止血带在抽血时不要扎的太紧,采血时刻不要太长[1],假如采血不顺利,血流速度缓慢或屡次穿刺采血困难,会激活凝血机制,使凝血因子活性增高,导致血浆凝固时刻缩短,也可发作细小凝块,耗费凝血因子,导致血浆凝固时刻延伸。

1.3 收集血液要避开输液侧的肢体

不要在输液时收集血液[2],输液时收集血液,血液被输注的液体很多稀释,构成凝血因子相对削减,导致试验成果的时刻延伸;更不能在静脉留置针内采血,由于静脉留置针内含有某种抗凝剂,会严峻影响某项试验成果的时刻延伸。

1.4 把握血液注入试管内的次序

采血结束后,血液向试管内注入的次序对血凝试验成果有必定的影响[3]。当用注射器采血时,请将后一管血液用于凝血项目的查看;当用一次性采血针采血时,请将第一管血液用于凝血项目的查看。原因是当用注射器采血时,采血结束后向试管内注入血液的进程中,后一管血液是在抽血时先进入注射器的部分;当用一次性采血针采血时,血液直接注入试管,第一管血液是先采出的部分。采血进程中静脉穿刺皮肤受损,安排因子会开释激活外源性凝血体系,止血带压榨时刻长也会激活凝血体系,影响试验成果,这样做能够确保先采出的血液用于凝血项目的查看所受的影响相对削减。

1.5 防止气泡发作

血液向试管内注入进程中,沿试管壁缓慢注入,防止发作气泡,由于泡沫的发作会使某些因子变性,然后影响试验成果。

1.6 确保正确的抗凝份额

严厉依照抗凝剂的份额要求采血量,浓度为109 mmol/L,3.8%枸橼酸钠抗凝剂0.2 ml,采血量1.8 ml,抗凝剂︰血液=1︰9。采血量过多,抗凝剂相对削减,引起血液抗凝不充分,血液发作细小的凝聚,耗费凝血因子,导致测定成果时刻延伸;采血量过少,抗凝剂相对增多,过剩的抗凝剂一方面会中和试剂中的钙离子,另一方面也会稀释血液,导致测定成果的时刻延伸。由于抗凝剂是针对血浆的量抗凝,所以当血细胞比容>55%或<20%时,运用下述公式校对抗凝剂的用量[4],抗凝剂的用量(ml)=0.00185×采血量(ml)×(100-患者血细胞比容)。

1.7 恰当的混匀办法

血液注入试管,要当即倒置混匀,混匀不完全,会发作细小凝块,耗费凝血因子,导致过错的试验成果;混匀时防止用力震动而损坏凝血蛋白或导致溶血发作,致使影响试验成果。

1.8 试管专用

抽血结束,血液必定要注入正确的试管,不然会引起过错的试验成果,关于任何试验项目都不答应从其他试管移除血液到另一支试管,不同试验项目用处的试管内所含物质不同,会对另一个试验项目的成果发作严峻影响,乃至是过错的试验成果。

2 标本别离

做血凝试验,对血浆别离的这一环节至关重要,不正确的离心力和离心时刻会对试验成果发作影响。

2.1 正确运用离心机

血浆别离时,要求的离心力是1500× g,离心时刻15 min,以取得乏血小板血浆[5]。不同的离心机,离心机的有用半径不尽相同。测得离心机的有用半径,依据公式RCF(g)=1.119×105×R×(r/s)2换算出所运用离心机的转速,其间RCF代表离心力,r/s代表每秒钟离心机的转速,g代表重力加速度9.8 m/s2,R代表离心的有用半径(m)。

2.2 取得乏血小板血浆

乏血小板血浆指血小板的量<10×109/L,假如样本的离心速度不行,时刻不行,则血浆中血小板的含量较高,会对血凝试验发作影响,由于血小板的磷脂膜参与凝血进程,血小板含有很多的磷脂,能够中和血浆中的狼疮抗凝物,导致狼疮抗凝物阴性。血小板中含有血小板因子(PF4),能中和标本中的肝素。20%的因子Ⅴ来自血小板,可导致因子Ⅴ增高。鉴于上述原因,采纳正确的离心速度和离心时刻,对获取正确的血凝试验成果至关重要。

3 标本寄存

惯例血凝试验在标本收集完结后,应赶快在最短时刻,最好在1 h内完结试验,如不能做到也应在2 h内检测结束,不然会对检测成果构成显着影响,跟着标本寄存时刻延伸,凝血因子会不断降解,不同的凝血试验项目,标本放置时刻对试验成果的影响也不尽相同。PT和凝血酶时刻(TT)检测成果在4 h内是安稳的,APTT检测成果在1 h内是安稳的,纤维蛋白原检测成果在2 h内是安稳的[6]。假如标本不能在规则时刻内完结,应别离血浆,运用塑料试管。密封后快速冷冻,贮存于-20℃或-70℃,冷冻保存的样本只能复融1次,要求在37℃水浴悄悄摇摆,敏捷消融。

4 血浆性状

标本别离后血浆的性状也会对血凝试验的成果发作某些影响,如溶血、乳糜血、黄疸等这些性状要引起查验人员的留意,标本溶血后,红细胞内容物的释出、红细胞膜外表的磷脂会对血凝试验发作影响[7]。含有乳糜颗粒的血浆,对运用免疫比浊法的项目,如D-二聚体发作严峻搅扰,鉴于标本自身的要素对试验成果的影响,查验人员要与临床医师进行交流,说明这些影响要素对试验的搅扰,提示查验成果的牢靠程度,供临床医师参阅,必要时从头采血进行测定。

5 反常成果的处理

最常见的是反响混合物不凝聚或显现成果失利,处理办法首先要扫除仪器或标本自身的原因,包含标本是否合格、是否溶血、是否乳糜血等,与临床医师进行交流,与临床症状是否相符,是否运用某些药物引起。某些药物自身就具有影响凝血机制的功用或是有协同抗凝效果[8],如水合氯醛、阿司匹林、保泰松、氯贝丁酯、吲哚美辛等可使口服抗凝药物在血液中浓度显着增高。有材料标明,大剂量运用青霉素,当血浆青霉素浓度达5000 U/ml时,PT、APTT显着延伸,且随药物浓度的添加而时刻延伸[9];头孢哌酮具有甲硫甲唑环的侧链与前凝血酶原相仿;羧酶可过错地与抗生素结合而导致凝血酶原的构成削减,搅扰肝脏中维生素K的代谢,导致低凝血酶血症[10]。肝素、华法林、双香豆素、低分子右旋糖酐等可抑制凝血酶,然后阻碍纤维蛋白原变为纤维蛋白,阻挠血小板的黏赞同集合,使血浆中抗凝物质含量增多,影响凝血试验,使凝固时刻延伸,有以上病史或药物史的患者都有可能影响血凝检测成果。

6 正确运用仪器,精心保护、保养仪器是获取精确查验成果的确保

严厉依照仪器的操作规程运用仪器,依照运用说明定时对仪器进行保护、保养和校准,运用仪器配套试剂,确保试剂上机的安稳性,替换试剂的批号要从头定标,坚持室内质控的连续性,均是获取精确查验成果所必需的。

综上所述,血凝试验成果受多要素影响,以上是在进行血凝试验进程中及在参与相关训练学习进程中,对影响试验成果的要素所进行的概括总结和一些浅显领会,关于从事临床查验的工作者来说,应引起注重。在日常工作中只要躲避这些影响要素,才干供给精确牢靠的血凝试验成果,用于临床疾病的确诊和医治。

[参阅文献]

[1]刘颖燕,徐彩萍.样本收集对血凝检测成果的影响[J].查验医学,2008,23(2):202-203.

[2]申子瑜,李萍.临床试验室管理学[M].北京:公民卫生出版社,2003:30-31.

[3]肖秀林,陈宏宇,王昌富,等.PT和APTT样本收集次序和保存温度的讨论[J].上海医学查验杂志,2001,16(2):104.

[4]从玉隆,王淑娟.今天临床查验学[M].北京:我国科学技术出版社,1997:10.

[5]张金莲.标本离心条件和放置时刻对凝血酶原时刻和活化部分凝血活酶时刻的影响[J].郑州大学学报·医学版,2004,39(4):675.

[6]汤荔,冯忠盈,曹文俊,等.样本寄存时刻对凝血目标影响的试验评价[J].查验医学,2010,25(1):8-12.

[7]欧阳良良.血凝功用反常筛查试验影响要素剖析[J].北方药学,2012,9(11):74.

[8]彭春花,王秀华,陈元媛.血凝试验查验成果的影响要素剖析[J].查验医学与临床,2010,7(16):1733-1735.

[9]常剑峰.大剂量β-内酰胺类抗生素凝血试验的搅扰[J].临床查验杂志,2000,18(4):211.

[10]徐淑云.临床用药攻略[M].合肥:安徽科学技术出版社,1997:58.

(收稿日期:2014-03-21本文修改:李亚聪)

[基金项目] 国家高技术研讨发展方案(863方案)(2011 AA02A111)

[作者简介] 郑雄图(1970-),男,本科,副主任查验师,查验科副主任

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[摘要]近年来,跟着查验医学的不断发展,各种先进的全自动血凝剖析仪在各级医院遍及运用,使血浆凝血试验的检测愈加趋于规范化、标准化,不同医院之间血凝试验成果的可比性日益进步,在出血与血栓性疾病的筛查、确诊及抗凝和溶栓医治的药物监测方面发挥了重要效果。血浆凝血试验不同于其他查验项目,影响要素许多,且具有特