CA433T：讨论T—SPOT.TB、CA125、TB—Ab在痰菌阴性肺结核确诊中的价值

杜岩青+张立+冯爽+冯冉冉

[摘要] 意图 评论T细胞斑驳实验（T-SPOT.TB）技能、糖类抗原125（CA125）测定与血清结核抗体（TB-Ab）测定，三种办法单一或联合检测对痰菌阴性肺结核的确诊价值。 办法 受试者均为我院住院患者共155例，其间痰菌阴性患者64例，痰菌阳性患者55例，非结核性肺疾病患者36例，对上述三项目标进行检测。 成果 单一目标确诊肺结核T-SPOT.TB的灵敏度为87.3%、特异度为83.3%，AUC为0.850，CA125的灵敏度为80.0%、特异度为72.2%、AUC为0.837；TB-Ab灵敏度为63.6%、特异度为80.6%、AUC为 0.790；T-SPOT.TB和TB-Ab联合确诊的灵敏度为94.5%，特异度为79.8%，AUC为0.988，T-SPOT.TB、TB-Ab、CA125三目标联合检测灵敏度为96.4%，特异度为44.4%，AUC为0.966。 定论 运用单一办法确诊痰菌阴性肺结核，T-SPOT.TB最有价值；联合检测时，T-SPOT.TB联合TB-Ab灵敏度较高，AUC最高，对痰菌阴性肺结核的确诊具有更大的临床使用价值。

[关键词] T-SPOT.TB；TB-Ab；CA125；确诊价值

[中图分类号] R521 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2014）32-0043-03

Value exploration of T-SPOT.TB， CA125 and TB-Ab in diagnosis of sputum bacteria-negative pulmonary tuberculosis

DU Yanqing ZHANG Li FENG Shuang FENG Ranran

Department of Clinical Laboratory，Tianjin Haihe Hospital，Tianjin 300350，China

[Abstract] Objective To investigate the diagnosis value of single or joint application of T cell spot test （T-SPOT.TB） technique， carbohydrate antigen 125 （CA125） determination and serum tuberculosis antibody （TB-Ab） determination in the detection of sputum bacteria-negative pulmonary tuberculosis. Methods All the 155 subjects were inpatients of Haihe Hospital， of which 64 patients were sputum bacteria-negative， 55 patients were sputum bacteria-positive and 36 patients suffered from non-tuberculosis pulmonary diseases. The above three indicators were detected. Results Regarding to single indicator diagnosis of pulmonary tuberculosis， the sensitivity， specificity and AUC of T-SPOT.TB were 87.3%， 83.3% and 0.850， the sensitivity， specificity and AUC of CA125 were 80.0%， 72.2% and 0.837， and the sensitivity， specificity and AUC of TB-Ab were 63.6%， 80.6% and 0.790. The sensitivity， specificity and AUC of T-SPOT.TB and TB-Ab joint detection were 94.5%， 79.8% and 0.988， and the sensitivity， specificity and AUC of T-SPOT.TB， TB-Ab and CA125 joint detection were 96.4%， 44.4% and 0.966. Conclusion For single-method diagnosis of sputum bacteria-negative pulmonary tuberculosis， T-SPOT.TB has the highest value； For joint detection， T-SPOT.TB combined with TB-Ab has higher sensitivity and the highest AUC， which is of larger clinical application value in the diagnosis of sputum bacteria-negative pulmonary tuberculosis.

[Key words] T-SPOT.TB； TB-Ab； CA125； Diagnosis value

结核病作为一种感染性疾病在全球已经成为一种公共卫生问题和社会问题。在我国，结核病的感染率高、耐药率高、死亡率高，使结核病的防备、确诊和临床医治显得尤为重要。惯例细菌学查看办法存在着灵敏度低、操作杂乱，需时刻较长和影响要素较多，不易规范化等缺点，使细菌学确诊发展缓慢，无法充沛满意临床确诊的需求。寻觅单一或联合确诊结核的新技能、新办法，为临床供给愈加快速精确的辨别和确诊。endprint

1 材料与办法

1.1 一般材料

悉数病例来源于本院2013年1月～2014年3月的住院患者，扫除材料不全的病例，共当选155例，其间男80例，女75例，年纪22～80岁，均匀41.5岁。痰菌阴性组（n=55）：其间男25例，女30例，年纪22～70岁，均匀39岁。3 次涂片1次培育均阴性， X 线胸片有活动肺结核征象和（或）临床症状，未经抗结核药医治或医治未超越1个月，契合2006年中华医学会结核病学分会拟定的“肺结核确诊和医治攻略”中菌阴活动性肺结核确诊规范[1]。痰菌阳性组（n=64）：其间男35例，女29例，年纪25～78岁，均匀43岁。契合国家规范感染性肺结核确诊规范。非结核肺病组36例，男20例，女16例，年纪25～80岁，均匀50岁。其间肺癌14例，缓慢阻塞性肺疾病4例，支气管肺炎10例，间质性肺炎5例，特发性肺间质纤维化3例，均无肺结核或肺外结核病史。

1.2 检测办法

T-SPOT.TB依据英国牛津Immunotec公司供给的T-SPOT.TB试剂盒，按其阐明书进行操作，以斑驳构成细胞（spot forming cells， SFCs）计数，即我院临床所用参考值为靶向抗原6（ESAT-6）或培育滤液蛋白10（CFP-10）任一个>24 SFCs/1×106即为阳性。TB-Ab依据英国OMEGA公司供给的结核抗体试剂阐明书进行操作，成果用酶标仪读取OD值，然后在规范滴度曲线表中查找，得出相应的标本滴度，即我院临床所用参考值TB-Ab滴度>400 U/mL为阳性。CA125选用罗氏e601电化学发光仪及其配套的试剂和耗材进行检测，按仪器阐明书操作，cut-off值为阐明书给定，即我院临床所用参考值CA125>35 U/mL为阳性。联合断定成果指T-SPOT.TB实验、CA125实验、TB-Ab实验的中只需其间任一项检测成果为阳性即判为联合阳性。

1.3 统计学办法

使用SPSS12.0统计学软件进行数据剖析，对各组数据进行正态性查验，阳性率的比较选用配对材料的McNemar查验；使用Medcalc 11.4软件制作ROC曲线，比较曲线下面积（AUC），断定临界值。P<0.05为差异有统计学含义。

2 成果

2.1 3种办法检测各组阳性率的比较

菌阳组、菌阴组别离与非结核病组比较，三目标均有显着性差异（P<0.05），阐明三目标对确诊菌阴性肺结核和菌阳性肺结核均有必定价值。见表1。

表1 3种办法检测各组阳性率的比较（%）

注：*为菌阳组与非结核病组阳性率比较之χ2值和P值，#为菌阴组与非结核病组比较之χ2值和P值

2.2 单一办法对确诊活动性肺结核的价值点评

T-SPOT.TB的灵敏度为87.3%，特异度为83.3%，约登指数为0.706，AUC为0.850；CA125的灵敏度为80.0%，特异度为72.2%，约登指数为0.522，AUC为0.837；TB-Ab灵敏度为63.6%，特异度为80.6%，约登指数为0.442，AUC为0.790，可见单一目标检测时无论是灵敏度、特异度，仍是约登指数，T-SPOT.TB均优于CA125和TB-Ab。见表2。

表2 CA125、TB-Ab及T-SPOT对确诊活动性肺结核的价值点评

2.3 3种办法联合检测的确诊效能点评

两种办法联合检测TB-Ab+ T-SPOT.TB的组合确诊菌阴性肺结核的灵敏度最高为94.5%，3种办法联合检测灵敏度略有进步，但特异度显着下降，见表3。

表3 菌阴组中3种办法联合检测的确诊效能点评

2.4 三种办法单一和联合确诊的ROC曲线剖析

单一目标确诊时T-SPOT.TB的ROC曲线下面积最大，联合确诊时TB-Ab+T-SPOT.TB组合ROC曲线下面积最大，见图1。

图1 几种确诊办法的ROC曲线图比较

3评论

T-SPOT.TB经过检测外周血中结核分枝杆菌感染后排泄特异性细胞因子γ-IFN的T细胞数量来确诊是否存在结核感染，及判别近期体内的抗原露出状况[2-4]。痰菌阳性组和痰菌阴性组T-SPOT.TB 阳性检出率为87.3%和83.3%不同不大，剖析原由于痰菌阴性的成果很大程度上受限于痰标本质量、检测手法和检测水平，由于二者在临床上都表现为活动性结核病，都表现了体内结核菌的活动，有可能两组患者外周血特异抗原的效应T细胞数量及应对水平相挨近，导致两组患者IFN-γ的排泄量也相挨近，菌阳肺结核能够经过痰菌得以确诊，菌阴肺结核的确诊常常较为困难，本研讨显现痰菌阴性组中T-SPOT.TB的敏感度和特异度别离为87.3%和83.3%，和曾谊等[5]报导（敏感度和特异度别离是89.1%和80.6%）附近，也与李红等[6]的报导（敏感度和特异度别离是85.8%和80.8%）附近。在3种查看办法中敏感度和特异度均最高。因而，单一目标而言，T-SPOT.TB对菌阴肺结核的确诊较有含义。非结核肺疾病中肺癌、矽肺、哮喘、支气管扩张与缓慢阻塞性肺病等都是易并发肺结核的疾病[7]。本组未经更详细查痰及其他查看来扫除并发肺结核的可能性。故是否并存肺结核导致本组中检测呈现较高的阳性率， 还需进一步评论，成果显现，菌阴肺结核患者各抗原影响后的血浆IFN-γ排泄量显着高于肺部其他疾病患者。虽然病例数量较少，但仍提示全血γ干扰素开释实验可用于肺结核与肺部其他疾病的辨别确诊。

CA125为体腔上皮细胞表达的一种分子量为200-1000KD的糖类蛋白，其在恶性肿瘤尤其是卵巢肿瘤的确诊已被广泛使用，近年来也有CA125与肺结核、结核性胸膜炎等的相关报导。正常状况下CA125由上皮细胞组成并储存在细胞内，由于细胞之间的衔接和基膜的阻挠效果，并不能进入血液循环，因而在正常人血清中含量甚微。在肿瘤或炎症等病理要素的影响下，CA125 排泄添加，细胞间的衔接和基膜平衡被损坏，进入血液循环，血清中CA125含量将显着上升[8]。在对菌阴性肺结核的确诊中，本研讨显现敏感度为80%，与左杨松[9]的报导（敏感度88.57%）附近，特异度为72.2%，低于左杨松的报导（特异度94.4%），原因可能是左杨松的研讨中疾病对照组扫除了肺癌，而CA125对肺结核与肺癌的辨别确诊含义不大[8]，这可能也是本研讨非结核肺病组中CA125阳性率较高的原因。Fortun等[10]的研讨显现CA125在辅佐确诊菌阴性肺结核中有必定的价值，与本研讨定论共同。endprint

血清TB-Ab是由机体感染结核杆菌后针对结核菌素混合抗原所发生的一组免疫球蛋白，是检测机体抗结核免疫反响体液免疫的一种办法，本研讨成果显现，血清TB-Ab在痰菌阳性组中的检出率较高，在痰菌阴性组中较低，仅有63.6%，在菌阴肺结核的确诊点评中，有着很好的特异性（80.6%），可是敏感性较低。血TB-Ab检测快速，办法简洁，但也会由于其他分枝杆菌感染及卡介苗接种等影响而呈现假阳性。机体免疫力低下，未发生足量的结核抗体，或许体内结核抗体与抗原结合，无游离的抗体存在，都会发生假阴性。

临床上为了进步确诊功率，一般选用两个或两个以上的确诊实验。本研讨显现，就菌阴肺结核而言，T-SPOT.TB联合TB-Ab敏感度显着添加，达94.5%，特异性较单项目标未见显着下降，AUC为0.988，再联合CA125后未能进一步进步AUC指数，提示在联合检测确诊菌阴肺结核中，T-SPOT.TB联合TB-Ab是检测菌阴性肺结核的较好挑选，因而T-SPOT.TB联合TB-Ab对菌阴性肺结核的确诊含义更大。

[参考文献]

[1] 2010年全国结核病流行病学抽样调查报告[J]. 我国防痨杂志，2012，V34（8）：485-508.

[2] Codecasa L，Mantegani P，Galli L，et al. An in-house RD1-based enzyme-linked immunospot-gamm a interferon assay instead of the tuberculin skin test for diagnosis of latent mycobacterium tuberculosis infection[J]. J Clin Microbiol，2006，44（1）：1944-1950.

[3] Lee LN，Chou CH，Wang JY，et al. Enzyme-linked immunospot assay for interferon-gamma in the diagnosis of tuberculous pleurisy[J]. Clin Microbiol Infect，2009，15（6）：173-179.

[4] Losi M，Bossink A，Codecasa L， et al. European Tuberculosis Network TBNET. Use of a T-cell interferon-gamma release assay for the diagnosis of tuberculous pleurisy[J]. Eur Respir，2007，30（6）：1173-1179.

[5] 曾谊，冯枭，宋梅梅，等. 酶联免疫斑驳实验在菌阴肺结核确诊中的价值[J]. 我国防痨杂志，2012，34（2）：100-102.

[6] 李红，唐神结，史祥，等. 全血γ-干扰素开释实验对涂阴肺结核确诊价值的研讨[J]. 中华临床医生杂志（电子版），2012，6（16）：324-326.

[7] 彭卫生，王英年. 新编结核病学[M]. 第2版. 北京：我国医药科技出版社，2006：342-361.

[8] 韩丹，陈志飞，邱鸣. CA125在肺结核、结核性胸膜炎与肺癌辨别确诊中的价值[J]. 临床肺科杂志，2008，13（3）： 1160-1161.

[9] 左杨松. 血清CA125在菌阴肺结核和其他肺部感染中的表达和临床含义[J]. 河北医药，2011，33（24）：3762-3763.

[10] Fortun J，Martin-Davila P，Mendez R，et al. CA-125：A useful marker to distinguish pulmonary tuberculosis from other pulmonary infections[J]. Open Respir Med J，2009， 20（3）：123-127.

（收稿日期：2014-07-24）endprint

血清TB-Ab是由机体感染结核杆菌后针对结核菌素混合抗原所发生的一组免疫球蛋白，是检测机体抗结核免疫反响体液免疫的一种办法，本研讨成果显现，血清TB-Ab在痰菌阳性组中的检出率较高，在痰菌阴性组中较低，仅有63.6%，在菌阴肺结核的确诊点评中，有着很好的特异性（80.6%），可是敏感性较低。血TB-Ab检测快速，办法简洁，但也会由于其他分枝杆菌感染及卡介苗接种等影响而呈现假阳性。机体免疫力低下，未发生足量的结核抗体，或许体内结核抗体与抗原结合，无游离的抗体存在，都会发生假阴性。

临床上为了进步确诊功率，一般选用两个或两个以上的确诊实验。本研讨显现，就菌阴肺结核而言，T-SPOT.TB联合TB-Ab敏感度显着添加，达94.5%，特异性较单项目标未见显着下降，AUC为0.988，再联合CA125后未能进一步进步AUC指数，提示在联合检测确诊菌阴肺结核中，T-SPOT.TB联合TB-Ab是检测菌阴性肺结核的较好挑选，因而T-SPOT.TB联合TB-Ab对菌阴性肺结核的确诊含义更大。

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（收稿日期：2014-07-24）endprint

血清TB-Ab是由机体感染结核杆菌后针对结核菌素混合抗原所发生的一组免疫球蛋白，是检测机体抗结核免疫反响体液免疫的一种办法，本研讨成果显现，血清TB-Ab在痰菌阳性组中的检出率较高，在痰菌阴性组中较低，仅有63.6%，在菌阴肺结核的确诊点评中，有着很好的特异性（80.6%），可是敏感性较低。血TB-Ab检测快速，办法简洁，但也会由于其他分枝杆菌感染及卡介苗接种等影响而呈现假阳性。机体免疫力低下，未发生足量的结核抗体，或许体内结核抗体与抗原结合，无游离的抗体存在，都会发生假阴性。

临床上为了进步确诊功率，一般选用两个或两个以上的确诊实验。本研讨显现，就菌阴肺结核而言，T-SPOT.TB联合TB-Ab敏感度显着添加，达94.5%，特异性较单项目标未见显着下降，AUC为0.988，再联合CA125后未能进一步进步AUC指数，提示在联合检测确诊菌阴肺结核中，T-SPOT.TB联合TB-Ab是检测菌阴性肺结核的较好挑选，因而T-SPOT.TB联合TB-Ab对菌阴性肺结核的确诊含义更大。

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（收稿日期：2014-07-24）endprint